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Análise do perfil de citocinas e quimiocinas e mecanismos de ativação e migração leucocitária em lesões renais de ratos com sindrome nefrótica induzida pela doxorrubicina
(UFVJM, 2018) Santos, Adriana Suellen dos; Pereira, Wagner de Fátima; Melo, Gustavo Eustáquio Brito Alvim de; Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM); Pereira, Wagner de Fátima; Melo, Gustavo Eustáquio Brito Alvim de; Carvalho Júnior, Álvaro Dutra de; Guimarães, Fábio Tadeu Lourenço
A síndrome nefrótica (SN) é definida por proteinúria maciça, edema, hipoalb uminemia e hiperlipidemia e desenvolve a partir da lesão dos glomérulos, especialmente d os podócitos. Pode ser um a alteração primária (idiopática), com o uma doença específica para os rins, ou secundária a alguma doença sistêmica prévia. Histologicamente, a síndrome nefrótica idiopática ( SNI ) é definida pela combinação das manifestações clínicas associadas às anormalidades histológicas inespecíficas do rim, incluindo glomerulo esclerose focal e segmentar (GESF). A SN pode ser estudada, em modelo animal, por m eio de injeções locais de Cloridrato de doxorrubicina ( Adriamicina® ) na dose de 7,5mg/kg em que, injeção intravenosa única pode induz ir proteinúria grave, semelhante à observada em humanos. Embora os mecanismos patogênicos da SNI persistam obscuros, altera ções das respostas imunológicas , como as respostas atípicas dos linfócitos T e a atuação de citocinas e quimiocinas, parecem estar envolvidas no dano aos glomérulos. Neste sentido, a finalidade do presente estudo foi avaliar a participação de citocinas e q uimiocinas, por meio da expressão de IL - 1, IL - 4, CXCL1, CCL3/MIP - 1 e CCL5/RANTES em amostras de tecido renal e de urina, nos mecanismos de ativação e migração leucocitária, bem como as alterações bioquímicas, histológicas e biométricas em ratos com SN indu zida pela doxorrubicina. O protocolo experimental foi devidamente registrado e aprovado pela comissão de ética no uso de animais, da Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (CEUA - UFVJM) sob o protocolo Nº 029/2014. Foram utilizados 25 rato s machos ( Wistar ) , peso médio de 350 gramas e idade média de seis semanas . Os animais foram divididos em dois grupos: CON (n=5), que recebeu injeção endovenosa de solução salina como grupo controle e DOXO (n=25), que recebeu injeção endovenosa de doxorrubi cina. Os animais do grupo DOXO foram eutanasiados e avaliados nos tempos 7, 14, 21 e 28 dias após a injeção. Foram coletadas amostras urinárias (24 hs) e amostras sanguíneas ( punção cardíaca). Após a coleta sanguínea, os órgãos foram perfundidos com soluçã o salina, sendo coletados os rins direito e esquerdo, que foram pesados e devidamente acondicionados , para posteriores análises biométricas, histológicas e imunológicas. A contagem total de leucócitos foi realizada em câmara de Neubauer. A avaliação das am ostras urinárias e teciduais para a detecção de citocinas e quimiocinas foi realizada por ELISA. A nimais do grupo DOXO desenvolveram proteinúria a partir do 7 º dia após a injeção de doxorrubicina , a qual permaneceu durante todo o período experimental. O bse rvou - se, ainda, hipercreatininemia, alterações biométricas , histológicas e dos leucogramas neste mesmo grupo . De modo geral, os animais expressaram maior concentração de citocinas e quimiocinas no tecido renal do que na s amostras de urina, sugestivo de um processo de secreção relacionad o à produção tecidual local. Além disso, o s resultados obtidos n o presente estudo proporciona ra m uma contribuição inédita em relação à participação da quimiocina CXCL1 na fisiopatogenia da SN. Sua expressão n a urina pode rá es tar r elacionada com a instalação das reações oxidativas nas fases iniciais da doença, conforme já demonstrado por nosso grupo, nest e modelo experimental . Podendo, ainda, sugerir a participação de leucócitos polimorfonucleares (neutrófilos) na etiopatogenia da SN , em sua fase inicial . Contudo, outros estudos serão necessários a fim de correlacionar a expressão tecidual d a citocina CXCL1 à presença de neutrófilos no tecido renal e, consequente, produção de radicais livres neste modelo experimental de nefropat ia induzida pela doxorrubicina.
Avaliação da atividade cicatrizante do extrato etanólico da Croton antisyphiliticus em feridas cutâneas de ratos
(UFVJM, 2019) Siqueira, Vanessa Luciene; Santos, Cynthia Fernandes Ferreira; Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM); Santos, Cynthia Fernandes Ferreira; Pereira, Wagner de Fátima; Miranda, João Luiz de
Uma das formas utilizadas para recuperação de feridas pela população é o uso de produtos naturais como as plantas medicinais, dentre tais espécies temos a Croton antisyphiliticus que desde o século XIX é utilizada popularmente para tal tratamento. O presente trabalho objetivou avaliar a atividade do extrato etanólico da Croton antisyphiliticus na cicatrização de feridas em ratos. Foram utilizados 07 ratos (Rattus norvegicus albinus) da linhagem Wistar. Em cada animal foram produzidas 4 feridas mecânicas paravertebrais submetidas cada uma a diferente tratamento. A primeira ferida não recebeu tratamento sendo denominada sem tratamento (ST), a segunda ferida foi tratada apenas com o veículo, sendo o gel de carbopol (G), a terceira ferida foi tratada com o gel associado ao extrato etanólico da Croton antisyphiliticusa 5% (G5%); e a quarta ferida foi tratada com o gel associado ao extrato etanólico da Croton antisyphiliticusa 10% (G10%). Para investigação do resultado experimental foi avaliado o período de retração das feridas e avaliação histológica de amostras dos tecidos cicatriciais coletados ao final do último dia de acompanhamento dos animais, com análise da angiogênese, células mononucleares, proliferação fibroblástica, re-epitelização e colagenização. Na avaliação macroscópica foi possível notar a diminuição gradativa das feridas e aumento da retração percentual das feridas no decorrer do estudo. As áreas das feridas regrediram de maneira expressiva em todos os grupos. Houve diferença entre o grupo G5% e o grupo ST nos dias 09, 10 e 13 de tratamento e entre o grupo G10% e o ST no 11º dia do tratamento. Com a avaliação microscópica foi obtido que de acordo com a avaliação da proliferação vascular foi observada presença de maior quantidade de novos vasos sanguíneos nos grupos G5% e G10%, os quais diferiram de ST. Em relação a intensidade de células mononucleares foi identificada diferença entre o grupo ST e os grupos G5% e G10%, sendo encontradas em maior quantidade em G5% e G10% que em ST. Na proliferação fibroblástica, colagenização e re-epitelização não foram identificadas diferenças entre os grupos. Os resultados do presente estudo permitem concluir que o uso tópico do extrato etanólico da Croton antisyphiliticus não apresenta efeito na cicatrização da pele em feridas cirúrgicas de ratos. Sua utilização no processo de cicatrização de feridas cutâneas permanece ainda campo aberto a estudos, no entanto é importante que se amplie o estudo experimental com outras doses e com análise de outros tempos do processo cicatricial, bem como possíveis mecanismos envolvidos no processo cicatricial.
Avaliação da resposta citológica e histológica do côndilo mandibular de ratos Holtzman após a estimulação protrusiva da mandíbula
(UFVJM, 2020) Otoni, Rejane Pereira; Silva, Thiago Fonseca; Pereira, Wagner de Fátima; Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM); Silva, Thiago Fonseca; Machado, Cristiane Tolentino; Maia, Naiara Gonçalves Fonseca
A capacidade de remodelação adaptativa da cartilagem/osso dos côndilos da mandíbula, em resposta aos estímulos funcionais, é uma condição que desperta o interesse de diversos pesquisadores no âmbito da Ortodontia. A adaptação da cartilagem condilar ao posicionamento anterior da mandíbula constitui um dos objetivos para as correções ortopédico-funcionais relacionadas ao tratamento das más oclusões de Classe II esqueléticas por deficiência mandibular. Entretanto, as repercussões oriundas dos aparelhos funcionais ainda não são completamente esclarecidas e geram grandes discussões entre ortodontistas e pesquisadores. O objetivo do presente estudo foi avaliar o comportamento citológico e histológico da região condilar de ratos frente ao estímulo de protrusão mandibular. Uma amostra de trinta ratos Holtzman machos foi aleatoriamente dividida em três grupos experimentais, com seus respectivos controles, em diferentes períodos de desenvolvimento (cinco, nove e treze semanas de idade). Cada grupo contou com cinco animais experimentais e cinco controles. Os animais dos grupos experimentais receberam pistas-planas (planos inclinados) nos incisivos superiores e inferiores confeccionadas em resina composta fotopolimerizável, que resultou na protrusão da mandíbula com o objetivo de estimular o crescimento condilar e mandibular. A eutanásia dos animais foi realizada após trinta dias de estimulação funcional. Posteriormente, as mandíbulas foram dissecadas e analisadas macroscopicamente. Os côndilos foram desmineralizados, parafinizados e preparados para a confecção de lâminas e coloração histológica em H&E. As análises citológicas e histológicas foram realizadas por meio de microscópio de luz. Os dados coletados foram tabulados no software SPSS 17.0 for Windows. A amostra apresentou distribuição normal e o teste “t” de Student foi utilizado para comparar os dados. Os resultados do presente estudo evidenciaram que no grupo de animais que foram estimulados funcionalmente, houve aumento do número de células da camada proliferativa e do tamanho mandibular em ratos de cinco semanas; aumento do número de células da camada fibrosa em ratos de nove semanas; e aumento da área da camada proliferativa em ratos de treze semanas. Conclui-se que a protrusão da mandíbula em ratos de cinco, nove e treze semanas de idade promoveu o aumento celular e da área em camadas distintas do côndilo. Contudo, mais estudos são necessários para melhor compreender as respostas adaptativas geradas no côndilo resultantes dos estímulos ortopédicos funcionais.
Avaliação do efeito do extrato etanólico de Pseudobrickellia brasiliensis em ratos com periodontite induzida por ligadura
(UFVJM, 2020) Andrade, Pedro Figueiredo Pereira de; Pereira, Wagner de Fátima; Gonçalves, Patrícia Furtado; Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM); Pereira, Wagner de Fátima; Oliveira, Dhelfeson Willya Douglas de; Oliveira Filho, Paulo Messias de
A periodontite é uma doença bucal que afeta a maior parte da população de adultos e é considerada um problema de saúde pública. O tratamento para essa doença consiste na raspagem e alisamento radicular e profilaxia para a remoção dos acúmulos de cálculo e biofilme dental. A fitoterapia vem sendo estudada como um tratamento adjuvante no combate à periodontite. O objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos do extrato etanólico de folhas de Pseudobrickellia brasiliensis relacionados à toxicidade oral tópica gengival e seus efeitos no tratamento da periodontite induzida por ligadura em ratos. Para a avaliação da toxicidade oral tópica, 4 ratos Wistar machos receberam aplicação da pomada de P. brasiliensis e foram avaliados quanto à aparência macro e microscopica da região em que a pomada foi aplicada. Depois disso, 24 ratos Wistar machos foram divididos em 4 grupos para avaliação do efeito da pomada no tratamento da doença periodontal induzida por ligadura em ratos (Grupo contole negativo; Grupo controle positivo; Grupo Pomada a 2,5% e Grupo Pomada a 5%) contendo 6 animais cada. Após a indução da doença periodontal por meio da colocação de ligadura de fio de algodão e passados 11 dias de tratamento com a pomada de P. brasiliensis, os animais foram eutanasiados e suas mandíbulas removidas para a obtenção de cortes histológicos dos primeiros molares inferiores direitos e esquerdos. A avaliação histométrica foi realizada por meio da quantifição do volume da região de lesão de furca, o que indica o volume de perda óssea alveolar inter-radicular dessa região. A análise intra-grupo revelou maior perda óssea nos dentes com ligadura do que nos dentes que não possuíam a ligadura (p<0,05), confirmando a eficácia do modelo. Entretanto, a análise inter-grupos não revelou diferenças estatisticamente significantes no volume de perda óssea nos dentes com ligadura entre os diferentes grupos experimentais (p>0,05). Conclui-se que a pomada não apresentou toxicidade aos tecidos periodontais e não reduziu o volume de lesão de furca.
Avaliação dos efeitos anti-inflamatório e antiedematogênico do gel Oxyflower® em modelo de edema de pata em ratos
(UFVJM, 2017) Cruz, Timilly Mayra Martins da; Araújo, Cintia Tereza Pimenta de; Pereira, Wagner de Fátima; Gonçalves, Patrícia Furtado; Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM); Araújo, Cintia Tereza Pimenta de; Melo, Gustavo Eustáquio Brito Alvim de; Mesquita, Ana Terezinha Marques
Introdução: A inflamação é um mecanismo de defesa primária que protege o organismo de estímulos nocivos ou prejudiciais. Os medicamentos anti-inflamatórios tais como os Anti-Inflamatórios Não Esteroidais (AINEs) e os corticosteróides são utilizados para tratar os distúrbios inflamatórios, porém, diversos efeitos colaterais têm sido relatados. Neste contexto, produtos naturais têm contribuído bastante para o desenvolvimento de terapias farmacológicas modernas e eficazes. Alguns medicamentos naturais apresentam grande potencial terapêutico, como por exemplo, o Oxyflower®. Este remédio baseia-se na ação de essências florais, porém seus efeitos biológicos ainda não foram devidamente investigados. Objetivos: Investigar os possíveis efeitos anti-inflamatório e antiedematogênico do gel Oxyflower® em modelo animal de inflamação crônica. Metodologia: 25 ratos machos da linhagem Holtzman foram aleatoriamente divididos em 5 grupos experimentais (controle, veículo do Oxyflower®, Oxyflower®, triancinolona acetonida e diclofenaco dietilamônio). A inflamação foi quimicamente induzida por meio da injeção de 200 μL de Adjuvante Completo de Freund (ACF) na pata traseira direita dos ratos. O volume e espessura das patas dos ratos foram mensurados com pletismômetro de pata e paquímetro digital, respectivamente. Durante 14 dias, os animais foram tratados com os fármacos e tiveram acompanhamento de sua massa corporal. Neste período a temperatura das patas traseiras foram avaliadas com um termógrafo digital. Foram realizadas análises histológicas e leucometria. Os dados foram analisados como média  erro padrão ou desvio padrão da média e apresentados como a variação (delta) do volume, espessura e temperatura das patas traseiras. As diferenças entre os grupos foram analisadas pelos testes de variância ANOVA (two e one-way), seguidos do post hoc de Tukey e teste Qui-Quadrado. Valores de p< 0,05 foram considerados significativos. Resultados: O gel Oxyflower® promoveu reduções no volume, espessura e temperatura das patas dos ratos, injetados com ACF, quando comparados aos animais do grupo controle. Não houve diferença em relação ao ganho de massa corporal nos diferentes grupos experimentais. Os resultados para leucometria e histologia não apresentaram diferenças significativas entre os grupos. Conclusão: O gel Oxyflower® apresentou atividade antiedematogênica semelhante à Triancinolona e ao Diclofenaco. A termografia infravermelha é um método aplicável na avaliação da temperatura tecidual associada ao edema, neste modelo experimental.
Composição química e efeito sobre mediadores inflamatórios de preparações de partes aéreas de Pseudobrickellia brasiliensis (Spreng) R. M. King & H. Rob (arnica-do-campo) in vitro
(UFVJM, 2015) Almeida, Valéria Gomes de; Melo, Gustavo Eustáquio Brito Alvim de; Universidade Fedaral dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM); Melo, Gustavo Eustáquio Brito Alvim de; Rocha-Vieira, Etel; Lopes, Miriam Teresa Paz; Santos, Raquel Gouveia dos; Pereira, Wagner de Fátima
A Pseudobrickellia brasiliensis (Spreng) R. M. King & H. Rob., (Asteraceae) é nativa da flora brasileira, e sua preparação alcoólica tem sido utilizada de forma tópica como anti-inflamatório na medicina popular. Tendo em vista a ausência de estudos acerca da bioatividade e composição química dessa espécie, o objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito de preparações de partes aéreas de P.brasiliensis sobre parâmetros inflamatórios, in vitro, e realizar a análise dos seus constituintes químicos. A triagem fitoquímica dos caules, flores e folhas da planta foi realizada por meio de reações cromogênicas, fluorogênicas e de precipitação e sugeriu a presença de saponinas, terpenos, taninos e flavonoides nas partes aéreas da planta. Os extratos etanólicos de caules (PBETca), flores (PBETfl) e folhas (PBETfo) foram avaliados por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada a detector de arranjo de diodos (CLAE-DAD). Essa análise sugeriu a presença de flavonoides nos extratos, especialmente das classes das flavonas e flavonóis. Os óleos essenciais de flores (PBOEfl) e de folhas (PBOEfo) foram analisados por Cromatografia Gasosa acoplada a Espectrômetro de Massas (CG-EM), sendo possível a identificação de 22 compostos no PBOEfl e 27 no PBOEfo, dentre os quais, o β-pineno, limoneno, α-pineno, sabineno, óxido de cariofileno e E-cariofileno estão presentes em maior valor percentual. Foram confeccionadas culturas de 4h de sangue total para avaliar o efeito hemolítico dos extratos, determinado pela densidade óptica do sobrenadante em 540 nm. Houve indução de hemólise em culturas tratadas com PBETca ou PBETfo em concentrações superiores a 100 μg/mL. O extrato PBETfl induziu hemólise em culturas na concentração final de 200 μg/mL. A toxicidade dos produtos naturais às Células Mononucleares do Sangue Periférico (PBMC) humano após 24 h e 5 dias, foi avaliada por citometria de fluxo, utilizando Azul de Tripan ou Iodeto de Propídeo. O efeito dos produtos naturais sobre a produção de TNF-α, IFN-γ e IL-2 foi determinado por ELISA do sobrenadante de culturas de 24 h, após estímulo com Miristato Acetato de Forbol (PMA) + Ionomicina. Todos os extratos e óleos essenciais reduziram a produção de TNF-α. A síntese de IFN-γ foi inibida pelo extrato PBETfo e pelo óleo essencial PBOEfl. Todos os extratos etanólicos e o PBOEfl, inibiram a produção de IL-2. O PBETfo foi fracionado por meio de partição em solventes com polaridade crescente e todas as frações foram eficientes em inibir a síntese de TNF-α, por PBMC, após 24 h de cultura. Somente a fração hexânica reduziu a síntese de IFN-γ e IL-2. Foram confeccionadas culturas de sangue total estimuladas com lipopolissacarídeo (LPS) para investigação do efeito dos óleos essenciais sobre a expressão de COX-2, por citometria de fluxo. Os óleos essenciais não interferiram na expressão de COX-2. Nossos achados sugerem que o efeito anti-inflamatório atribuído à P.brasiliensis na medicina popular pode, pelo menos em parte, ser devido à inibição da produção de citocinas pró-inflamatórias por linfócitos e monócitos humanos. É possível que flavonoides das subclasses das flavonas e flavonóis possam contribuir para a atividade biológica dos extratos etanólicos de P. brasiliensis. Muitos monoterpenos e sesquiterpenos presentes nos óleos essenciais de flores e folhas de P. brasiliensis já tiveram a atividade anti-inflamatória descrita em outros trabalhos.
Efeitos da ingestão do óleo de pequi (Caryocar brasiliense) na resposta imune da mucosa intestinal de camundongos
(UFVJM, 2019) Moreno, Lauane Gomes; Esteves, Elizabethe Adriana; Melo, Gustavo Eustáquio Brito Alvim de; Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM); Esteves, Elizabethe Adriana; Melo, Gustavo Eustáquio Brito Alvim de; Sampaio, Kinulpe Honorato; Silva, André Talvani Pedrosa da; Maioli, Tatiane Uceli; Pereira, Wagner de Fátima
Atualmente, diversas áreas científicas têm focado suas pesquisas em propriedades funcionais de alimentos e produtos alimentícios, das quais destacam-se efeitos imunomoduladores. Dentre esses alimentos está o óleo de pequi (Caryocar brasiliense), que apresenta diversos efeitos biológicos tais como melhoria do metabolismo lipídico, melhoria da função cardiovascular e atividade antioxidante. Esse óleo contém em sua composição química um alto conteúdo de carotenoides e ácidos graxos monoinsaturados, que de acordo com estudos prévios, isoladamente, podem alterar a resposta imune, em especial a resposta imune da mucosa intestinal. Nesse sentido, o objetivo desse trabalho foi investigar os efeitos da ingestão do óleo de pequi (Caryocar brasiliense) na resposta imune de mucosa intestinal de camundongos. Para isso foram investigados os efeitos da ingestão diária de 280mg de óleo de pequi em elementos da resposta imune da mucosa intestinal em duas condições: 1) na mucosa íntegra e 2) na ruptura da integridade da mucosa, representada por uma doença inflamatória intestinal. Foram utilizados 60 camundongos C57BL/6 machos, que após o período de adaptação (7 dias), iniciaram a Fase 1 do estudo (suplementação com óleo de pequi, 28 dias). Tais animais foram divididos em: Grupo Controle (C) que recebeu apenas ração comercial e água filtrada ad libitum e grupo Óleo de Pequi (OP) que recebeu diariamente, além da ração e água, 280 mg de óleo de pequi homogeneizados em 1,11g de ração triturada, na forma de um pellet. Após esse período, cada um dos dois grupos experimentais foi sub-dividido em grupos C, Controle com Colite (CC), OP e Óleo de Pequi com Colite (OPC). Deu-se início então à Fase 2 do estudo referente à continuidade da suplementação e indução da doença inflamatória intestinal por 8 dias. Na Fase 2, os grupos CC e OPC passaram a receber, além dos tratamentos iniciais, solução aquosa de dextran sulfato de sódio (DSS), a 1,5%, ad libitum. A ingestão alimentar e o peso corporal foram monitorados durante todo o experimento. No nono dia, após a fase 2, os animais foram eutanasiados para coleta de amostras. Foi avaliado o fenótipo de leucócitos isolados das superfícies das mucosas do intestino delgado (ID) e cólon, dos linfonodos mesentéricos e do baço. Determinou-se também as concentrações de Imunoglobulina A (IgA) no plasma e de IgA secretória (IgAs) nos lavados de ID, cólon, e fezes, das citocinas IL-2, IL-4, IL-6, TNFα, IFNγ, IL-17, IL-10 no plasma e em homogenatos de ID e cólon e de proteína C reativa (C reactive protein - CRP) no plasma. Durante a indução da colite foi calculado o Índice de Atividade de Doença (scores médios de diarreia, sangramento retal e perda de peso) e ao final foi avaliado o score histopatológico total na mucosa colônica. Na integridade da mucosa, a ingestão do óleo de pequi (OP vs C, p<0,05) induziu no ID redução de linfócitos de superfície T totais, T auxiliares e de IFNγ; no cólon, redução de linfócitos de superfície T citotóxicos e IgAs; nos linfonodos, redução de linfócitos T citotóxicos; no baço, redução de linfócitos T auxiliares e citotóxicos; e no plasma redução de IL-2, CRP e do % de neutrófilos e aumento de IL-10 e do % de linfócitos. Em condições de ruptura da integridade da mucosa intestinal, a ingestão do óleo de pequi (OPC vs CC, P<0,05), reduziu a perda de peso e diarreia. No ID elevou linfócitos de superfície T γδ e reduziu IL-6, no cólon também elevou os linfócitos de superfície T γδ e reduziu os T citotóxicos e a perda de criptas e células caliciformes; nos órgãos linfoides essa ingestão reduziu linfócitos T citóxicos e no plasma reduziu a IL-17 e a CRP. Assim, a ingestão do óleo de pequi parece ter reforçado a resposta reguladora do sistema imune de mucosa, o que possivelmente contribuiu para que, em condições de ruptura da integridade intestinal, houvesse melhoria do quadro clínico e histopatológico, elevação de células com potencial de ação regulatória e redução de mediadores pró-inflamatórios e de células com atividade citotóxica.
Efeitos da perda de peso corporal induzida por dieta hipolipídica ad libitum e pela restrição calórica com dieta hiperlipídica na inflamação do tecido adiposo de camundongos obesos
(UFVJM, 2017) Rodrigues, Manuela Ortega Marques; Esteves, Elizabethe Adriana; Magalhães, Flávio de Castro; Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM); Esteves, Elizabethe Adriana; Magalhães, Flávio de Castro; Pereira, Wagner de Fátima; Peixoto, Marco Fabricio Dias
A expansão do tecido adiposo branco na obesidade leva à expressão alterada de proteínas em seus adipócitos, bem como a infiltração de células do sistema imune, especialmente macrófagos, cujas secreções levam ao desenvolvimento da inflamação crônica de baixo grau, a qual é considerada subjacente ao desenvolvimento de inúmeras comorbidades. Dentre as formas de tratamento da obesidade, dietas de restrição calórica (RC) nutricionalmente balanceadas induzem a perda de peso e melhorias em marcadores sistêmicos da inflamação, mas os efeitos diretos no tecido adiposo visceral ainda são controversos. No entanto, existe uma lacuna sobre qual o impacto dessas dietas na inflamação local, mesmo em condições de sobrecarga lipídica. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da perda de peso corporal induzida por dieta hipolipídica ad libitum e pela restrição calórica com dieta hiperlipídica na inflamação do tecido adiposo visceral de camundongos obesos. Para tal, inicialmente, camundongos C57BL/6 com 12 semanas de idade, machos, foram divididos em dois grupos: LF – alimentados com dieta controle hipolipídica – do inglês low fat (10% das calorias, fonte óleo de soja, rica em ácidos graxos poli-insaturados); e HF – alimentados com dieta controle hiperlipídica – do inglês high fat (60% calorias, fonte banha de porco, rica em ácidos graxos saturados) para indução da obesidade. Após oito semanas, seis animais de cada grupo foram eutanasiados para verificação da adiposidade visceral e estado inflamatório (dosagens de proteína C reativa – PCR sérica e hepática). Em seguida, os animais HF foram aleatoriamente divididos em três grupos HF – continuaram recebendo dieta HF; LFAL – submetidos ao emagrecimento pela substituição da dieta HF pela LF e acesso livre (ad libitum) e RHF – submetidos ao emagrecimento por receberem quantidades restritas em calorias da dieta HF para atingir o mesmo peso corporal dos animais LFAL. A partir deste momento, esses grupos foram alimentados, juntamente com os animais LF, por mais sete semanas. Ao final, foram avaliados o ganho/perda de peso corporal, a adiposidade, as concentrações séricas e hepáticas de PCR, e as concentrações de leptina, adiponectina, e das citocinas IL-6, TNF e MCP-1 no tecido adiposo retroperitoneal, além da morfologia dos adipócitos e a presença de infiltrados inflamatórios no tecido adiposo retroperitoneal. Ao final da fase de indução da obesidade, os animais HF estavam obesos e inflamados. Ao final da fase de indução da perda de peso, os grupos LFAL e RHF tiveram pesos corporais semelhantes, menores que o HF e se igualaram ao LF. No entanto, houve maior dificuldade em perder peso pelo grupo RHF em comparação ao LFAL, dado pelas diferenças significativas entre os deltas de perda de peso, que foram menores para RHF e pelos coeficientes de eficiência energética, que foram maiores para o grupo RHF. Os animais LFAL retornaram a adiposidade e a hipertrofia dos adipócitos viscerais a valores semelhantes ao grupo LF. Isto provavelmente foi o que levou à menor concentração de leptina com concomitante aumento da adiponectina e menor infiltração de células inflamatórias neste tecido, igualando-se também ao LF. Em consequência, houve menor concentração tecidual de citocinas pró-inflamatórias, além de menor concentração hepática e circulante de PCR. Já para os animais RHF, houve apenas atenuação da adiposidade e da hipertrofia dos adipócitos retroperitoneais. Isso foi suficiente para restabelecer a concentração local de leptina a níveis semelhantes ao grupo LF, embora não tenha elevado a concentração de adiponectina. Além disso, a infiltração de células inflamatórias menteve-se também elevada. Não houve redução da concentração de citocinas pró-inflamatórias, à exceção da IL-6, que reduziu levemente. A concentração hepática de PCR foi atenuada, o que não refletiu na concentração sérica dessa proteína. Concluiu-se que a restrição calórica com dieta hiperlipídica foi menos eficiente em promover a perda de peso e de adiposidade e não melhorou a inflamação do tecido adiposo visceral, comparada com a dieta hipolipídica ad libitum. Inferiuse que a ingestão de dieta com sobrecarga de lipídeos (60% das calorias) e de ácidos graxos saturados foi mais determinante da inflamação local do que a restrição calórica per se.
Efeitos do treinamento intervalado de alta intensidade sobre a progressão da periodontite e parâmetros comportamentais em ratos Wistar com doença periodontal induzida por ligadura
(UFVJM, 2023) Pereira, Ramona Ramalho de Souza; Andrade, Eric Francelino; Peixoto, Marco Fabrício Dias; Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM; Andrade, Eric Francelino; Peixoto, Marco Fabrício Dias; Pereira, Wagner de Fátima; Moura, Rodrigo Ferreira de
A periodontite é uma doença inflamatória crônica que afeta os tecidos de suporte dos dentes, resultando na destruição progressiva do osso alveolar e do ligamento periodontal. Essa condição tem efeitos sistêmicos, levando potencialmente ao aumento de doenças metabólicas, comprometimento cognitivo e aumento da ansiedade. Nesse contexto, o exercício físico tem se mostrado uma estratégia não farmacológica relevante para a redução dos impactos negativos da periodontite. O exercício físico tem a capacidade de regular a inflamação local e sistêmica, além de reduzir o risco de infecções. Uma forma alternativa de exercício que atraiu interesse entre os pesquisadores é o Treinamento Intervalado de Alta Intensidade (HIIT). O HIIT tem sido considerado uma estratégia eficiente de tempo para a prática de exercícios. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do Treinamento Intervalado de Alta Intensidade na progressão da perda óssea alveolar, inflamação sistêmica e parâmetros comportamentais na periodontite induzida por ligadura em ratos Wistar. O estudo utilizou 48 ratos com 90 dias de idade, distribuídos aleatoriamente em quatro grupos: não treinados (NT), não treinados com doença periodontal (DP), treinamento intervalado de alta intensidade com doença periodontal (HIIT-PD) e alta -treinamento intervalado de intensidade (HIIT). Os animais foram familiarizados com uma corrida em esteira por 1 semana e realizaram um teste de capacidade aeróbia máxima (VO2max) antes do treinamento. O protocolo de treinamento físico consistiu em sessões diárias de um HIIT em esteira consistindo de um aquecimento de 3 minutos, seguido de 6 sessões de corrida a 90-100 VO2max, intercaladas por 2 minutos de intervalos de recuperação passiva e 3 minutos desaquecimento, totalizando 22 minutos de sessão de exercício por dia, 5 dias/semana, durante oito semanas. Na sexta semana do protocolo experimental, os ratos dos grupos DP e HIIT-DP foram submetidos à indução da doença periodontal por meio da colocação de ligadura nos primeiros molares inferiores bilateralmente. Após o treinamento, os animais realizaram testes comportamentais para avaliar o comportamento de ansiedade e a capacidade de memória. Análises sanguíneas (ELISA), análises morfométricas, microscopia eletrônica de varredura (MEV) e espectroscopia de energia dispersiva (EDS) foram realizadas nas mandíbulas dos animais. Os resultados demonstraram que a periodontite causou efeitos prejudiciais na perda óssea alveolar e o HIIT reduziu parcialmente a perda óssea induzida pela periodontite. O grupo HIIT-DP exibiu menos danos na superfície do dente em comparação com o grupo DP. Dados de inflamação sistêmica revelaram que o grupo DP apresentou menor concentração da citocina IL-10 e maior concentração de TNF-α em relação aos demais grupos. Um aumento nas relações TNF-α/IL-10 e IL-1β/IL-10 também foi observado no grupo DP. Os dados dos testes comportamentais revelaram que o grupo DP exibiu maior comportamento de ansiedade e pior desempenho de memória em comparação com os outros grupos, enquanto o grupo HIIT apresentou melhorias nesses testes. Esses resultados sugerem que a periodontite aumenta o comportamento de ansiedade, piora a memória e aumenta a inflamação sistêmica, enquanto o treinamento HIIT abole parcial ou totalmente esses efeitos negativos da periodontite. Assim, o exercício físico, especialmente o HIIT, pode desempenhar um papel importante no controle dos efeitos negativos da periodontite, tanto local quanto sistemicamente.
Estudo dos efeitos de diferentes doses do diurético furosemida na indução de diurese e nos parâmetros bioquímicos, inflamatórios e histológicos de ratos com nefropatia induzida pela doxorrubicina
(UFVJM, 2023) Trindade, Thaís; Pereira, Wagner de Fátima; Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM)
A Síndrome Nefrótica (SN) é uma doença renal caracterizada por proteinúria maciça, hipoalbuminemia, hiperlipidemia e edema decorrentes de anormalidades na permeabilidade da membrana dos capilares glomerulares. O tratamento baseia-se no uso de corticosteroides e de medidas para controle de sinais e sintomas, dentre as quais se destaca o uso de diuréticos, como a furosemida, para resolução do edema. Além dos comprovados efeitos diurético e anti-hipertensivo, alguns estudos evidenciaram possível efeito inibidor da furosemida sobre a resposta inflamatória, bem como efeito protetor sobre a função renal e o estado redox. Contudo, a literatura carece de estudos que avaliem esses efeitos no âmbito da SN. Diante disso, no presente estudo, avaliou-se os efeitos de diferentes doses de furosemida em parâmetros bioquímicos, inflamatórios e histológicos de ratos com nefropatia induzida pela doxorrubicina. Foram utilizados 30 ratos Wistar machos com peso médio de 250 gramas. Os animais foram divididos em 5 grupos experimentais: grupo controle (CON): animais que receberam injeção endovenosa (EV) de solução salina estéril e gavagem com água filtrada, grupo DOXO: animais que receberam injeção EV de doxorrubicina e gavagem com água filtrada, e grupos F10, F25 e F50: animais que receberam injeção EV de doxorrubicina e gavagem com furosemida nas respectivas doses de 10, 25 e 50 mg/kg de peso corporal. Em diferentes tempos experimentais (T0, T7, T14, T21, T28 e T35), os animais foram pesados e colocados em gaiolas metabólicas por 24 horas. No dia 0 do experimento, foi realizada a indução da nefropatia por injeção EV de dose única de doxorrubicina (7,5mg/kg). Os tratamentos com furosemida ou água filtrada tiveram início 7 dias após a indução da SN e foram administrados por gavagem, diariamente, durante 28 dias. No 35º dia, os animais foram anestesiados e eutanasiados. As análises incluíram: mensuração do peso corporal, peso renal, consumo de água, volume de urina, análises histológicas, bioquímicas, avaliação do estado redox e leucometria. Conforme esperado, a doxorrubicina induziu proteinúria, hipoalbuminemia, hiperlipidemia e alterações histológicas compatíveis com a SN. A furosemida na dose de 10 mg/kg demonstrou poucas alterações nos parâmetros analisados. Já a dose de 25mg/kg foi a mais efetiva em induzir diurese a longo prazo, embora com menor efeito sobre a excreção urinária de sódio. Além disso, reduziu os níveis de LDL e o percentual de monócitos sanguíneos e aumentou a creatinina plasmática. A dose de 50mg/kg foi a mais efetiva na indução de diurese a curto prazo, promoveu maior natriurese, reduziu o score de lesão glomérulo-tubular e o percentual de monócitos e linfócitos circulantes, bem como aumentou a celularidade intersticial renal, a creatinina plasmática e as respostas oxidativa e antioxidante no tecido renal. Portanto, conclui-se que, a depender da dosagem utilizada, o tratamento com a furosemida mostrou diferentes efeitos positivos, como redução do percentual de monócitos circulantes, melhora do perfil lipídico e redução na intensidade das lesões no tecido renal. Contudo, alguns efeitos negativos também foram observados, como o aumento da concentração plasmática de creatinina e da resposta oxidativa do tecido renal em modelo experimental de nefropatia induzida pela doxorrubicina.
Indução de fluorescência interferente em culturas de linfócitos humanos pelo tratamento com três extratos vegetais
(UFVJM, 2017) Ottoni, Marcelo Henrique Fernandes; Melo, Gustavo Eustáquio Brito Alvim de; Pereira, Wagner de Fátima; Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM); Melo, Gustavo Eustáquio Brito Alvim de; Sampaio, Kinulpe Honorato; Carvalho Júnior, Álvaro Dutra de
A presença de fluorescência interferente em uma dada amostra é considerada como um importante problema em métodos fluorimétricos, devido à possível sobreposição espectral entre ela e a emissão fluorescente de sondas. Por isso, é importante conhecer se há fluorescência interferente em uma dada amostra e substâncias de interesse nas condições de trabalho pretendidas. No presente estudo, foi avaliada a presença de fluorescência interferente em linfócitos humanos após o tratamento com extratos de três diferentes plantas medicinais, sendo estas, objeto de estudo do nosso grupo de pesquisas. Os extratos são: o extrato etanólico das partes aéreas de Ageratum fastigiatum, extrato etanólico das partes aéreas de Eriosema campestre e o extrato etanólico do caule de Pseudobrickellia brasiliensis. Foi coletado o sangue de três voluntários para a separação das células mononucleares de sangue periférico, para a confecção de culturas in vitro em meio RPMI devidamente suplementado. Foram feitas uma cultura controle não-tratada (CON), culturas tratadas com cada extrato em três concentrações diferentes, além de uma cultura de células tratadas com dimetilsulfóxido (DMSO), solvente usado na solubilização dos extratos vegetais. As culturas celulares foram incubadas por 24 horas a 37 °C e 5% de CO2. Após esse período, as células foram lavadas e avaliadas por citometria de fluxo ou por microscopia confocal. A presença de fluorescência interferente foi determinada com base em histogramas de intensidade de fluorescência feitos para oito intervalos de comprimento de onda distintos, tendo sido feitas análises quali e quantitativas dos dados. A fluorescência dos extratos vegetais e DMSO foram avaliadas isoladamente por fluorimetria, usando-se as mesmas concentrações utilizadas para as culturas celulares. Através da citometria de fluxo, foi identificado que o tratamento de linfócitos com qualquer um dos três extratos de plantas levou ao aparecimento de fluorescência interferente detectável em várias faixas de comprimento de onda. Culturas tratadas com DMSO não apresentaram fluorescência interferente. Pela fluorimetria foi visto que os extratos não emitem fluorescência, o que sugere que a fluorescência interferente foi induzida nas células após interações entre elas e os extratos. Este estudo levanta precauções que visam avaliar a possível presença de fluorescência interferente em condições de trabalho, possibilitando evitar esse viés e aumentar a confiabilidade dos resultados.
Influência do tratamento com o diurético furosemida nas alterações biométricas, histológicas e nas respostas inflamatória, diurética e de proteinúria, em ratos com nefropatia induzida pela doxorrubicina
(UFVJM, 2021) Amaral, Bianca Lara Silva; Pereira, Wagner de Fátima; Melo, Gustavo Eustáquio Brito Alvim de; Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM); Pereira, Wagner de Fátima; Esteves, Elizabethe Adriana; Santos, Sandro Luiz Barbosa dos
A síndrome nefrótica (SN) é uma nefropatia caracterizada por proteinúria maciça, hipoalbuminemia, edema generalizado e hiperlipidemia e pode ser de origem primária (idiopática) ou secundária. Em pacientes que apresentam edema devido à nefropatia, o diurético furosemida é um dos mais utilizados. Além disso, o possível papel da furosemida na resposta imunológica vem sendo cada vez mais estudado. Assim, a finalidade do presente estudo foi avaliar a influência do tratamento com o diurético furosemida em alterações biométricas, histológicas e nas respostas inflamatória, diurética e de proteinúria, de ratos com nefropatia induzida pela doxorrubicina (CEUA/UFVJM #001/2019). Foram utilizados 18 ratos Wistar machos, com peso médio de 180 gramas no início do experimento. Os animais foram divididos em 3 grupos experimentais: CONTROL – Grupo Controle Negativo (sem nefropatia e sem tratamento) (n=6). DOXO – Grupo Controle Positivo (com nefropatia e sem tratamento) (n=6). DOXO-F – Grupo Teste (com nefropatia e tratamento com Furosemida por via oral) (n=6). Nos dias 0, 7, 14, 21, 28 e 35 foi avaliado o consumo de água e realizada a coleta de urina dos animais para posteriores análises. No dia 37, todos os animais foram eutanasiados e coletou-se sangue, baço e rim para análises. Os animais do grupo DOXO-F apresentaram proteinúria, maior relação diurese/consumo de água 24h, aumento da massa esplênica, menor peso corporal, além de apresentar diminuição do número de glomérulos em relação ao grupo CONTROL Com relação à resposta imunológica, ocorreu maior leucometria devido ao aumento de neutrófilos, diminuição de TNF-α, aumento de TGF-β, aumento de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico e proteína carbonilada, assim como de FRAP (Ferric- reducing ability of plasma), Superóxido Dismutase e Catalase. Estes resultados sugerem uma possível atuação da furosemida na tentativa de solucionar o processo inflamatório local, induzindo como consequência, um aumento da fibrose no tecido renal.
Influência do uso da furosemida sobre o comportamento da pressão arterial, a excreção renal de sódio/potássio e a evolução da lesão renal em modelo experimental de nefropatia
(UFVJM, 2020) Santos, Tatiele Pereira dos; Pereira, Wagner de Fátima; Brito Melo, Gustavo Eustáquio Alvim; Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM); Pereira, Wagner de Fátima; Santos, Sandro Luiz Barbosa dos; Fagundes Moura, Cristiane Rocha
A síndrome nefrótica (SN) é uma glomerulopatia caracterizada por alterações clínicas e bioquímicas que incluem edema, hipoalbuminemia, dislipidemia e proteinúria intensa. Essa comorbidade acomete adultos e crianças e pode ser provocada por doenças renais primárias ou secundárias. Nos pacientes portadores de nefropatia que apresentam edema ou retenção de sal e água, os diuréticos são precisamente indicados, sendo a furosemida um dos mais utilizados mesmo havendo controvérsias sobre seu uso no tratamento da doença. É sabido que o edema tecidual, a hipertensão arterial e a retenção dos íons sódio e potássio são características comuns, tanto nos pacientes quanto nos modelos experimentais de SN. O modelo experimental de indução da SN pelo fármaco Cloridrato de Doxorrubicina tem sido bem aceito e amplamente utilizado. Assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar a influência do uso da furosemida sobre o comportamento da pressão arterial, a excreção renal de sódio/potássio e a evolução da lesão renal em ratos com nefropatia induzida pela Doxorrubicina. Foram utilizados 18 ratos Wistar machos, com peso médio de 180 gramas no início do experimento. Os animais foram divididos em 3 grupos experimentais: Grupo CONTROL (n=6), animais controles que receberam injeção endovenosa de salina e também não foram tratados após a injeção, DOXO (n=6) animais que receberam injeção endovenosa de Doxorrubicina e não foram tratados após a injeção e DOXO-F (n=6), animais que receberam injeção endovenosa de Doxorrubicina e foram tratados com o diurético Furosemida após a injeção. Durante os dias 0, 7, 14, 21, 28 e 35 foi avaliado o consumo de água e realizado a coleta de urina dos animais para realização de posteriores análises. A pressão arterial e a frequência cardíaca também foram avaliadas nos dias 0, 8, 15, 22, 29 e 36. A eutanásia dos animais, por exsanguinação, ocorreu 37 dias após a indução da nefropatia, sendo realizada coleta de material biológico para posteriores análises. Os resultados demonstraram que a furosemida foi capaz de reduzir os níveis da pressão arterial, aumentar a diurese quando relacionada ao consumo de água pelos animais, além da tendência em reduzir a dislipidemia e aumentar a excreção renal de sódio. Na dosagem utilizada a furosemida não foi capaz de provocar alterações em outros parâmetros como frequência cardíaca, massa renal, teor de umidade renal, peso corporal e proteinúria.
Instrumento de medição em forma de pinças para pequenas medidas em experimentação animal, áreas anatômicas e áreas de difícil acesso
(INPI, 2019-11-05) Mourão, Marco Túlio Moreira; Meireles, Agnes Batista; Torres, Libardo Andrés González; Pereira, Wagner de Fátima; Melo, Gustavo Eustáquio Brito Alvim; Cruz, Tímilly Mayra Martins da; Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM)
"O invento é um instrumento de medição ergonomicamente mais viável, com extremidades das pinças achatadas de modo a permitir maior estabilidade de medição, dispensar o uso de molas e proporcionar resultado de medição mais confiável. Dispositivo projetado para efetuar medição em arco com as pinças (3) e (4) possuindo uma região circular vazada (1) e pinças coplanares que rotacionam conforme o eixo formado pelo pino fixador (2). Uma saliência (9) vazada em (8) para o posicionamento do polegar do operador e outra grande saliência (5) vazada em (7) para posicionamento dos demais dedos da mão possibilitam ergonomia de uso. O corpo a ser medido é então posicionado na abertura formada pelas pontas da pinça em (14), e ao fechar a abertura para medir, tal valor é obtido por meio do alinhamento das marcações da escala móvel (10) com as da escala fixa (12). A medição é estabilizada através de parafuso de fixação (11) na escala fixa (12). O dispositivo é limitado a valor máximo de medição através de um freio (6). O invento pode ser utilizado em tecidos vivos incluindo sistemas e órgãos; tecidos de animais em experimentação ou tecidos não vivos em áreas de difícil acesso ou proporções diminutas."
Potencial anti-inflamatório e antioxidante do extrato etanólico de raízes de Eriosema campestre var. macrophyllum (Grear) Fortunato
(UFVJM, 2021) Ottoni, Marcelo Henrique Fernandes; Melo, Gustavo Eustáquio Brito Alvim de; Pereira, Wagner de Fátima; Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM); Melo, Gustavo Eustáquio Brito Alvim de; Pereira, Wagner de Fátima; Villela, Daniel Campos; Klein, André; Kassuya, Candida Aparecida Leite; Souza, Michaelle Geralda dos Santos
Na medicina popular, preparações etanólicas das raízes da planta Eriosema campestre var. macrophyllum, são utilizadas como agente anti-inflamatório. Estudos sugerem que o extrato etanólico de suas raízes possui atividade imunomoduladora, mas seu efeito sobre a inflamação aguda é desconhecido. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o potencial terapêutico de EC-RA sobre elementos da resposta inflamatória aguda. Avaliamos a atividade antioxidante dos extratos etanólicos de partes aéreas (EC-AE) ou raízes (EC-RA) de E. campestre, pelos ensaios de Folin-Ciocauteau, de capacidade antioxidante total e de 2,2-difenil-2- picrilhidrazina (DPPH●). Realizaram-se ensaios in vitro com células RAW 264.7 estimuladas por lipopolissacarídeo bacteriano (LPS) por 24 horas. A partir de concentrações não citotóxicas obtidas pelo ensaio de 3-(4,5-dimetil-2-tiazolil)-2,5-difenil-2H-tetrazólio (MTT), foi testado o efeito de EC-RA sobre a produção de TNF, IL-6 e MCP-1, por ELISA, sobre a produção de óxido nítrico (NO) pelo método de Griess e sobre a fagocitose de zimosan-FITC por microscopia confocal. Investigou-se ainda a atividade anti-inflamatória de EC-RA administrado oralmente, utilizando os modelos de edema de pata induzido por carragenina em ratos Holtzman e de inflamação pulmonar induzida em camundongos C57Bl/6J pela instilação intranasal de LPS. Observamos que EC-AE e EC-RA apresentaram quantidade de compostos fenólicos e atividade antioxidante maiores em relação ao controle do solvente. EC-RA apresentou efeito inibitório sobre a produção de IL-6 [Controle não tratado (NT): 122,5 ± 11,9 pg/ml vs. EC-RA a 40μg/ml: 69,9 ± 7,2 pg/ml, p<0,05], e sobre MCP-1 (NT: 1879 ± 125 pg/ml vs. EC-RA a 10: 1345 ± 186 pg/ml; a 20: 1286 ± 75pg/ml; e a 40μg/ml: 804 ± 86pg/ml, p<0,05). Não foi observado efeito sobre a produção de TNF ou sobre a atividade fagocítica. Células tratadas com EC-RA produziram menos NO quando comparadas à cultura NT (NT: 7,61 ± 1,62μM vs EC-RA a 10: 4,13 ± 1,02μM; 20: 2,77 ± 1,08 μM; e 40μg/ml: 2,00 ± 0,98 μM). EC-RA diminuiu o edema de pata em ratos [% inibição do edema 6h após a indução: grupo veículo (VEÍC): 20,5 ± 18,47 vs EC-RA a 430mg/kg: 60,0 ± 29,74, p<0,05], e reduziu o número de leucócitos no lavado broncoalveolar de camundongos com inflamação pulmonar (VEÍC: 520,0 ± 115,4 x 103 células/ml vs EC-RA a 430mg/kg: 221,9 ± 27,06 x 103 céls./ml). Assim, nossos resultados sugerem uma ação biológica de EC-RA sobre parâmetros da resposta inflamatória aguda, possivelmente pela inibição de IL-6, MCP-1 e NO.