Acurácia da PCR em tempo real na deteção do Mycobacterium leprae em raspados intradérmicos direto (Swab) e de lâmina de baciloscopia

Abstract

A hanseníase é uma doença dermatoneurológica infecciosa e crônica, considerada a causa mais frequente de deficiências físicas em todo o mundo. Permanece como um grande desafio para a saúde pública do Brasil, que está classificado como um país de alta carga para a doença e configura o segundo lugar em número de casos entre todas as nações. A inexistência de uma vacina específica faz com que o diagnóstico precoce e, consequentemente, o tratamento oportuno, seja a forma mais eficaz de se combater a doença. Os exames laboratoriais são ferramentas importantes para complementação da avaliação clínica-epidemiológica e as técnicas moleculares surgiram na esperança de diminuir as limitações existentes no diagnóstico laboratorial da hanseníase. Este estudo objetivou avaliar a acurácia da Reação em Cadeia da Polimerase em tempo real (qPCR) na detecção do Mycobacterium leprae em raspados intradérmicos direto (swab) e em esfregaços de lâminas de baciloscopia. Trata-se de uma pesquisa observacional e transversal para avaliação de testes diagnósticos, que utilizou o exame de baciloscopia como padrão-ouro. Foram incluídos participantes com suspeitas epidemiológicas e/ou clínica de hanseníase da região nordeste de Minas Gerais, encaminhados ao Laboratório Macrorregional para a coleta de raspado intradérmico dos lóbulos auriculares, cotovelo direito, cotovelo esquerdo ou lesão suspeita. As baciloscopias foram realizadas segundo o Guia de Procedimentos Técnicos do Ministério da Saúde e as amostras de DNA, após extração e quantificação, foram submetidas a qPCR com primers específicos para a região RLEP de Mycobacterium leprae. As análises estatísticas descritivas, comparativas e de acurácia foram feitas utilizando-se os softwares Minitab 17 e GraphPad Prism versão 6.00. O estudo obteve o número de 45 amostras coletadas de casos suspeitos de hanseníase no período compreendido entre maio/2022 e fevereiro/2023. O perfil social e clínico da população do estudo ficou restrito aos casos notificados no SINAN e os indivíduos do sexo masculino, faixa etária entre 40 e 49 anos, raça/cor parda e de baixa escolaridade foram os mais presentes na amostra. A forma clínica e a classificação operacional predominantes foram a dimorfa (48,1%) e a multibacilar (74,1%). A sensibilidade da qPCR nas amostras de raspados intradérmicos direto (swab) e dos esfregaços de lâminas, em comparação com a baciloscopia, foi de 100%. A especificidade foi maior na qPCR das amostras de swab de raspado (64,3%) que nas lâminas de baciloscopia (53,8%). O desempenho da qPCR nas amostras de swab de raspado intradérmicos e de lâmina de baciloscopia indicou acurácias de 82,10% e 76,9%, respectivamente. Os resultados da comparação das proporções de positividade da qPCR das duas amostras mostraram associação estatisticamente significativa (P-valor = 0,025), com um grau de concordância de 57% (Kappa = 0,57). Em conjunto, os resultados das análises do desempenho e comparativas da qPCR em swab de raspados intradérmicos e lâminas de baciloscopia mostram boa acurácia em relação à baciloscopia e moderada concordância entre essas diferentes estratégias de qPCR.