Detecção simultânea das doenças de chagas e leishmaniose visceral: uma plataforma específica para o diagnóstico point-of-care

Abstract

A doença de Chagas (DC) e a de Leishmaniose Visceral (LV) são enfermidades que apresentam grande impacto na saúde pública. Ambas são causadas por protozoários pertencentes à mesma família, a Trypanosomatidae. A proximidade genética dessas doenças causa reatividade cruzada dos anticorpos com os antígenos ubíquos, o que resulta em baixa especificidade dos testes diagnósticos utilizados para identificação de tais doenças, podendo incorrer em falsos resultados. Esse problema causa dificuldades ainda maiores se considerado as regiões co-endêmicas para essas doenças. Assim esse trabalho buscou inicialmente testar uma plataforma simples de reconhecimento utilizando a técnica de espectroscopia de impedância eletroquímica (EIE) através da imobilização de antígenos brutos de L. infantum em monocamadas auto-organizadas (SAMs) de ácido 3-mercaptopropiônico (3-MPA), para o reconhecimento de anticorpos específicos do parasito presentes em soros caninos positivos para LV. Todos os parâmetros da análise foram otimizados para a detecção da doença utilizando o dispositivo proposto. Desta forma, com os resultados satisfatórios obtidos essa plataforma foi adaptada para um sistema de eletrodos impressos duplos de carbono, formandos por dois eletrodos de trabalho (W1 e W2) que podem permitir a detecção simultânea das doenças de Chagas e Leishmaniose Visceral. Para isso, foram utilizados antígenos recombinantes T. cruzi (IBMP8.1) e L. infantum (rLCi1,2) que aumentam a especificidade da análise realizada e diminuem a ocorrência de possíveis reações cruzadas. Nessa plataforma, os antígenos recombinantes IBMP8.1 e L. infantum (rLCi1,2) foram imobilizados nos eletrodos W1 e W2, respectivamente, modificados com filme poliméricos obtidos através da eletropolimerização do ácido 4 -hidroxifenilacético (4-HFA). O imunossensor proposto foi desenvolvido e caracterizado com sucesso, sendo um sistema simples, eficaz e específico para a discriminação do reconhecimento dos anticorpos de DC e LV presentes em soros caninos e humanos, o que representa um campo encorajador para o progresso do diagnóstico dessas doenças em regiões endêmicas e co-endêmicas. Os resultados apresentados podem trazer contribuições significativas para a sociedade, principalmente em regiões mais pobres que sofrem com o impacto dessas doenças e não possuem acesso a exames clínicos de rotina para início do tratamento. Neste contexto, o objetivo principal do trabalho foi desenvolver um template de um dispositivo do tipo point of care que possa ser utilizado em postos de pronto atendimento, acelerando o diagnóstico das doenças de DC e LV, e consequentemente iniciando o tratamento de pessoas infectadas com essas doenças, proporcionando uma melhor qualidade de vida e menores custos ao sistema de saúde pública (SUS).