Lipases produzidas por Aspergillus sp. ARC3: influência das condições de cultivo e atividade enzimática

Abstract

As lipases possuem grande valorização biotecnológica, sendo utilizadas em diversos setores industriais, dentre eles o alimentício, farmacêutico e energético, na produção de ésteres metílicos ou etílico de ácidos graxos, conhecidos como biodiesel. O objetivo desse estudo foi o isolamento de fungos filamentosos promissores lipolíticos a partir de amostras de cascas dos frutos e óleo de macaúba, assim como, analisar as características dos microrganismos isolados, o efeito da temperatura no crescimento dos fungos, a seleção de um dos isolados para a produção de lipases, bem como a otimização do meio de cultivo e a caracterização bioquímica da enzima produzida. Coletaram-se amostras da casca e do óleo de macaúba, sendo isolados nove fungos filamentosos com características macroscópicas morfológicas semelhantes, os quais cresceram preferencialmente à 30°C em meio de cultura sólido contendo azeite. A produção qualitativa de lipases foi avaliada em meio cultura sólido contendo azeite de oliva, à 30°C, por dois dias, sendo selecionadas três linhagens fúngicas identificadas como ARO1, ARO2 e ARC3, com raios enzimáticos de 0,43 cm, 0,30 cm e 0,27 cm, respectivamente. Esses três isolados foram submetidos à determinação da produção quantitativa de lipases em meio de cultura submerso Carvalho-Peixoto (CP) contendo glicerol como fonte de carbono, à 30ºC, por três dias, e a maior atividade lipolítica foi observada pelo fungo ARC3, seguido de ARO1 e ARO2. O MEV da cepa ARC3 sugeriu que esse microrganismo se trata de um fungo do gênero Aspergillus. A otimização foi padronizada em meio de cultura submerso CP contendo ureia como fonte de nitrogênio, pH inicial de cultivo 5,0, sais do próprio meio CP, glicerol bruto como fonte de carbono, e volume de inóculo de 1 mL (2,2.109 conídios.mL-¹), à 30ºC, de forma estacionária durante quatro dias em estufa bacteriológica. O uso do metanol como solvente aumentou a atividade lipolítica e o fosfato cálcio monobásico praticamente triplicou a atividade enzimática. A lipase produzida hidrolisou diferentes substratos, dentre eles os óleos de girassol, macaúba e germe de trigo. Com base nesses resultados, pode-se afirmar que a lipase produzida por Aspergillus sp. ARC3 aprosentou-se como promissora para aplicações industrias dentre elas na produção de biodiesel.