PMPGCF - Doutorado em Ciências Fisiológicas (Teses)
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Item Potencial anti-inflamatório e antioxidante do extrato etanólico de raízes de Eriosema campestre var. macrophyllum (Grear) Fortunato(UFVJM, 2021) Ottoni, Marcelo Henrique Fernandes; Melo, Gustavo Eustáquio Brito Alvim de; Pereira, Wagner de Fátima; Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM); Melo, Gustavo Eustáquio Brito Alvim de; Pereira, Wagner de Fátima; Villela, Daniel Campos; Klein, André; Kassuya, Candida Aparecida Leite; Souza, Michaelle Geralda dos SantosNa medicina popular, preparações etanólicas das raízes da planta Eriosema campestre var. macrophyllum, são utilizadas como agente anti-inflamatório. Estudos sugerem que o extrato etanólico de suas raízes possui atividade imunomoduladora, mas seu efeito sobre a inflamação aguda é desconhecido. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o potencial terapêutico de EC-RA sobre elementos da resposta inflamatória aguda. Avaliamos a atividade antioxidante dos extratos etanólicos de partes aéreas (EC-AE) ou raízes (EC-RA) de E. campestre, pelos ensaios de Folin-Ciocauteau, de capacidade antioxidante total e de 2,2-difenil-2- picrilhidrazina (DPPH●). Realizaram-se ensaios in vitro com células RAW 264.7 estimuladas por lipopolissacarídeo bacteriano (LPS) por 24 horas. A partir de concentrações não citotóxicas obtidas pelo ensaio de 3-(4,5-dimetil-2-tiazolil)-2,5-difenil-2H-tetrazólio (MTT), foi testado o efeito de EC-RA sobre a produção de TNF, IL-6 e MCP-1, por ELISA, sobre a produção de óxido nítrico (NO) pelo método de Griess e sobre a fagocitose de zimosan-FITC por microscopia confocal. Investigou-se ainda a atividade anti-inflamatória de EC-RA administrado oralmente, utilizando os modelos de edema de pata induzido por carragenina em ratos Holtzman e de inflamação pulmonar induzida em camundongos C57Bl/6J pela instilação intranasal de LPS. Observamos que EC-AE e EC-RA apresentaram quantidade de compostos fenólicos e atividade antioxidante maiores em relação ao controle do solvente. EC-RA apresentou efeito inibitório sobre a produção de IL-6 [Controle não tratado (NT): 122,5 ± 11,9 pg/ml vs. EC-RA a 40μg/ml: 69,9 ± 7,2 pg/ml, p<0,05], e sobre MCP-1 (NT: 1879 ± 125 pg/ml vs. EC-RA a 10: 1345 ± 186 pg/ml; a 20: 1286 ± 75pg/ml; e a 40μg/ml: 804 ± 86pg/ml, p<0,05). Não foi observado efeito sobre a produção de TNF ou sobre a atividade fagocítica. Células tratadas com EC-RA produziram menos NO quando comparadas à cultura NT (NT: 7,61 ± 1,62μM vs EC-RA a 10: 4,13 ± 1,02μM; 20: 2,77 ± 1,08 μM; e 40μg/ml: 2,00 ± 0,98 μM). EC-RA diminuiu o edema de pata em ratos [% inibição do edema 6h após a indução: grupo veículo (VEÍC): 20,5 ± 18,47 vs EC-RA a 430mg/kg: 60,0 ± 29,74, p<0,05], e reduziu o número de leucócitos no lavado broncoalveolar de camundongos com inflamação pulmonar (VEÍC: 520,0 ± 115,4 x 103 células/ml vs EC-RA a 430mg/kg: 221,9 ± 27,06 x 103 céls./ml). Assim, nossos resultados sugerem uma ação biológica de EC-RA sobre parâmetros da resposta inflamatória aguda, possivelmente pela inibição de IL-6, MCP-1 e NO.Item Análise da composição química, atividade citotóxica e inibição de citocinas in vitro de preparações de partes aéreas da planta ageratum fastigiatum(UFVJM, 2013) Freitas, Bethânia Alves de Avelar; Melo, Gustavo Eustáquio Brito Alvim de; Rocha-Vieira, Etel; Universidade Fedaral dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM); Francischi, Janetti Nogueira; Lopes, Miriam Teresa paz; Miranda, João Luiz de; Mendonça, Vanessa AmaralAgeratum fastigiatum é uma planta utilizada na medicina popular como anti-inflamatório e analgésico, no entanto, poucos estudos foram realizados a fim de detalhar os mecanismos envolvidos nessa atividade. O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade anti-inflamatória in vitro do óleo essencial e do extrato diclorometânico de A. fastigiatum. Pela técnica de exclusão do azul de tripam por citometria de fluxo foram determinadas concentrações não tóxicas das preparações de A. fastigiatum. As concentrações não tóxicas do óleo essencial foram 5x10-3 e 1x10-2 µL/mL. Essas concentrações foram utilizadas para a pesquisa do potencial anti-inflamatório do óleo essencial, medido por meio da análise do perfil de citocinas pro (TNF- α e IFN- γ) e anti-inflamatórias (IL-10), em culturas de leucócitos humanos estimulados e não estimulados com PMA (acetato de forbol miristato) . Os dados demonstraram que ambas as concentrações inibiram o percentual de linfócitos-TNF+ nas culturas estimuladas com PMA. A análise cromatográfica em fase gasosa acoplada a espectrometria de massas (CG/EM) revelou como principais constituintes no óleo essencial as substâncias α-pineno (7,51%), limoneno (5,9%), óxido de cariofileno (13,59%), 1,2 epóxido humuleno (8,41%) e 1,6-humulanodien-3-ol (17,71%). O extrato diclorometânico de A. fastigiatum, na concentração 20 µg/mL, não apresentou toxicidade aos leucócitos do sangue periférico humano e reduziu o percentual de linfócitos-TNF-α+ e linfócitos-IFN-γ+ nas culturas estimuladas com o PMA. Este extrato foi fracionado em coluna de Sephadex LH-20 (150 g). Na análise de citocinas, a fração 10 (AFDM 10), na concentração 10 µg/mL, demonstrou efeito anti-inflamatório in vitro reduzindo a frequência de linfócitos-TNF-α+ e a proliferação de linfócitos estimulados com PHA (fitohemaglutinina). Sugere-se que parte da atividade anti-inflamatória de A. fastigiatum se dê pela inibição que os constituintes da planta promovem sobre a ativação de leucócitos.