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Desenvolvimento de um imunosensor pela técnica de ressonância de plásmons de superfície para detecção em tempo real de anticorpos anti - leishmania infantum
(UFVJM, 2012) Souto, Dênio Emanuel Pires; Damos, Flávio Santos; Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM); Munoz, Rodrigo Alejandro Abarza; Luz, Rita de Cássia Silva; Martins, Helen Rodrigues; Damos, Flavio Santos
Neste trabalho, foi realizado o desenvolvimento de um imunosensor para detecção de anticorpos anti-Leishmania infantum. O princípio de transdução foi a Ressonância de Plásmons de Superfície (SPR) e o sensor foi produzido através da imobilização covalente de antígenos solúveis de Leishmania infantum sobre Monocamada Auto-Organizada (SAM) do ácido 11-Mercaptoundecanóico (11-MUA) ativado pela mistura contendo 100,0 mmol.L-1 de 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil) carbodiimida (EDC) e 150 mmol.L-1 de N-hidroxisuccinimida (NHS). Através das técnicas de Voltametria Cíclica e Redução Dessortiva por Voltametria de Pulso Diferencial o processo de formação da SAM foi otimizado. Sob condições otimizadas, 1,0 mmol.L-1 da solução etanólica de 11-MUA e 24 horas foram suficientes para a formação de uma SAM estável sobre a superfície de ouro. Para obtenção de informações complementares da SAM, foram realizados cálculos da Cobertura de Superfície, Constante Dielétrica e Espessura do tiol adsorvido no substrato de ouro. Após esta etapa, a adição de antígenos solúveis de L. infantum sobre a SAM foi acompanhada por SPR. As técnicas de Voltametria Cíclica e Espectroscopia de Impedância Eletroquímica foram usadas para caracterizar a imobilização do antígeno. Após construção do imunosensor, foram adicionados em sua superfície soros caninos positivos para Leishmaniose Visceral, evidenciando variação significativa no ângulo de SPR, mostrando excelente sensibilidade da técnica para detecção da interação antígeno-anticorpo. Por outro lado, a adição dos soros negativos não foi acompanhada com resposta significativa, concluindo-se também que o imunosensor apresentou boa especificidade contra anticorpos anti-L. infatum. Portanto, neste trabalho foi desenvolvido com sucesso um sensor empregando SPR para detecção em tempo real de anticorpos anti-L. infatum, apresentando grande perspectiva como sistema de sensoriamento da Leishmaniose Visceral em áreas endêmicas.
Identificação e determinação de novas substâncias psicoativas em amostras de selos por técnicas voltamétricas usando eletrodo de diamante dopado com boro
(UFVJM, 2018) Souza, Glayton Andrade; Santos, Wallans Torres Pio dos; Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM); Santos, Wallans Torres Pio dos; Lemos, Leandro Rodrigues de; Souto, Dênio Emanuel Pires; Malagutti, Andréa Renata
Atualmente existem novas substâncias psicoativas (NPS) destacando-se, a classe dos NBOMes (2,5-Dimetoxi-N-(2-metoxibenzil)feniletilaminas), que possui diversos compostos com pequenas variações químicas estruturais, principalmente, pela adição de um halogênio ao anel benzênico. Os halogênios mais adicionados são o bromo, cloro e iodo, os quais são conhecidos pelas siglas 25B-NBOMe, 25C-NBOMe e 25I-NBOMe, respectivamente. Os NBOMes estão entre as drogas sintéticas psicoativas emergentes encontradas em selos com padrão de uso recreativo. Anteriormente, a única droga encontrada em selos era o ácido lisérgico, mais conhecida pela sua sigla LSD. A identificação preliminar desses compostos é de extrema importância na área forense, em especial, para lavratura de auto de prisão em flagrante delito. No entanto, ainda não é utilizado nenhum método para identificação preliminar dos NBOMes pela perícia criminal, havendo apenas o método preliminar para o LSD e os métodos de identificação definitiva para NBOMes, os quais, em geral, são realizados por LC-MS e CG-MS. Neste contexto, os métodos eletroanalíticos podem ser uma alternativa de análise simples, rápida e de baixo custo para identificação dos NBOMes. O presente trabalho apresenta, pela primeira vez, o comportamento eletroquímico desses compostos e seus similares no eletrodo de diamante dopado com boro (BDD), bem como a detecção e identificação preliminar dessa classe de drogas em selos por voltametria cíclica (VC) e de onda quadrada (VOQ). O LSD, os NBOMes e um composto similar, o 2C-B, foram investigados por voltametria cíclica em tampão acetato e Britton-Robinson (pH 2 a 12). As melhores condições foram obtidas em tampão acetato 0,1 mol L-1 (pH 4) com 10 % de metanol, onde foi observado picos de oxidação no BDD para todos os analitos, sendo proposto um mecanismo para os processos eletroquímicos dos NBOMes. Os parâmetros da VOQ foram otimizados com a amplitude de pulso de 70 mV e a frequência de 80 S-1. Nessas condições, foi possível identificar os NBOMes seletivamente do LSD, obtendo um baixo DPR (< 1,0%) para 10 análises de todos os compostos, além de uma ampla faixa linear (de pelos menos 3 ordens de magnitude) com baixo limite de detecção (< 0,28 μg/mL). Amostras de 12 selos apreendidas com diferentes NBOMes e drogas similares foram avaliadas pelo método proposto, sendo os resultados comparados e confirmados pelo método definitivo. Portanto, o método proposto apresenta um grande potencial para identificação preliminar dos NBOMEs em selos.